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1936年9月，美国政府任命詹森为首任驻华特命全权大使。抗战前的美国大使馆设在上海路82号，抗战胜利后，1946年7月，美国政府任命司徒雷登为大使，接替詹森。大使馆馆址迁到西康路，原上海路馆舍改为新闻处。

西康路美国大使馆馆舍由三幢造型相同、规模相等的西式楼房和三幢西式平房构成，依山坡地势而建。三幢馆舍为公寓式建筑，砖石结构，高二层，另有地下室一层，每幢楼房建筑面积936平方米。正立面中部为门廊、阳台，四面坡屋顶， 屋脊两侧及后部竖有用来取暖的壁炉烟囱。房屋平面呈 "凹" 字形，底层正面和侧面为起居通廊， 中部为客厅和办公室， 后部为厨房、餐厅，卧室、盥洗间布置在楼上，地下室为锅炉房及贮藏室。

三幢平房建在每幢大楼后面，是随从人员及仆役的住所，每幢建筑面积96平方米，砖木结构，灰板条天花，普通木地板。

抗日战争胜利后，美国大使馆于1946年4月由重庆迁来南京。由于美国在国共对立双方中充当调停人的角色，因而美国大使馆也就成了世人瞩目的焦点。

1949年4月23日，南京解放。1950年2月18日，美国政府最后一名外交官培根离开南京返回美国。

1992年，美国大使馆旧址被列为南京市文物保护单位。

位于南京市鼓楼区琅琊路l号。1937年前，陈昌祖购地716平方米，建有砖木结构的西式二层楼房l幢，平房l幢，建筑面积285．1平方米。该处曾租给美国大使馆，1949年lO月初，美国大使馆退租，1950年4月该处为市房管局代管。